目前国内尚无完整的、统一的妇产科内分泌性激素测定值,且由于各种试剂的来源,测定的方法,数据的计算,采用的单位不同,即使同一激素标本,各实验室所得结果也不完全相同。下列有关性激素检查参考值系参考国内外各种专业书藉、杂志等资料汇集而成,希望能为各位同道提供有益的参考。 一、检查性激素常识 检查基础性激素前至少一个月不能用性激素类药物(包括黄体酮、雌激素类),否则结果不可靠(治疗后需要复查性激素除外)。 月经任何时间检查性激素都可以,每个时段的正常值不同。但是诊治不孕症一定要了解基础性激素水平,首先要选择月经第2~5天检查,称为基础性激素水平,第3天测定最好。确定是来月经第3天,检查性激素5项即可,可以不查孕酮,孕酮应该在黄体期检查(月经21天或排卵后7天);但不能肯定阴道流血是否月经,应该检查6项,以防止误诊(根据P数据可以大概判断月经周期时段)。 月经稀发及闭经者,如尿妊娠试验阴性、阴道B超检查双侧卵巢无≥10mm卵泡,EM厚度﹤5mm,也可做为基础状态。基础性激素化验单应该这样看:基础LH和FSH正常值为5~10IU/L,基础E2正常值为25~50pg/ml(这3项结果不能看化验单上的参考值,要按这个标准);PRL、T可以对照该医院化验单参考值,P正常值见后。 二、性激素检查的临床意义 (一)FSH和LH:基础值为5~10IU/L 正常月经周期中,卵泡早期(月经2~3天)血FSH、LH均维持在低水平,排卵前迅速升高,LH高达基础值的3~8倍,可达160IU/L甚更高,而FSH只有基础值的2倍左右,很少﹥30IU/L,排卵后FSH、LH迅速回到卵泡期水平。监测卵泡早期的FSH、LH水平,可以初步判断性腺轴功能。FSH在判断卵巢潜能方面比LH更有价值。 1、卵巢功能衰竭:基础FSH﹥40IU/L、LH升高或﹥40IU/L,为高促性腺激素(Gn)闭经,即卵巢功能衰竭;如发生于40岁以前,称为卵巢早衰(POF)。 2、基础FSH和LH均﹤5IU/L为低Gn闭经,提示下丘脑或垂体功能减退,而二者的区别需借助促性腺激素释放激素(GnRH)试验。 3、卵巢储备功能不良(DOR):基础FSH/LH﹥2~3.6提示DOR(FSH可以在正常范围),是卵巢功能不良的早期表现,往往提示患者对超排卵(COH)反应不佳,应及时调整COH方案和Gn的剂量以提高卵巢的反应性,获得理想的妊娠率。因为FSH/LH升高仅仅反映了DOR,而非受孕能力下降,一旦获得排卵时期,仍能获得理想的妊娠率。 4、基础FSH﹥12IU/L,下周期复查,连续﹥12IU/L提示DOR。 5、多囊卵巢综合征(PCOS):基础LH/FSH﹥2~3,可作为诊断PCOS的主要指标(基础LH水平﹥10IU/L即为升高,或LH维持正常水平,而基础FSH相对低水平,就形成了LH与FSH比值升高)。 6、检查2次基础FSH>20IU/L,可认为是卵巢早衰隐匿期,提示1年后可能闭经。 (二)P:基础值一般<1ng/ml 正常情况下,卵泡期血P一直在较低水平,平均0.6~1.9nmol/L,一般<10nmol/L(3.15ng/ml);排卵前出现LH峰时,P分泌量开始增加,排卵后卵巢黄体产生大量P,血P浓度迅速上升;黄体成熟时(LH峰后的6~8天),血P浓度达高峰,可达47.7~102.4nmol/L(15~32.2ng/ml)或更高,然后不断下降,月经前期达最低水平。整个黄体中外周血的P含量变化呈抛物线状。 1、判断排卵:黄体中期(月经周期28日的妇女为月经第21日)P>16nmol/L (5ng/ml)提示排卵,﹤16nmol/L(5ng/ml)提示无排卵。 2、诊断黄体功能不全(LPD):黄体中期P﹤32nmol/L(10ng/ml)、或排卵后第5、7、9天3次测P,总和﹤95.4nmol/L(30ng/ml)为LPD;或孕10周前P﹤47.7nmol/L(15ng/ml)为诊断LPD的标准。 3、判断体外受精-胚胎移植(IVF-ET)预后:排卵前P水平可以估计IVF-ET预后。肌注HCG日P≥3.18nmol/L(1.0ng/ml)应视为升高,种植率及临床妊娠率均下降,P﹥4.77nmol/L(1.5ng/ml)提示过早黄素化。 在IVF-ET长方案促排卵中,肌注HCG日即使并无LH浓度的升高,若P(ng/ml)×1000/E2(pg/ml)>1,提示卵泡过早黄素化,且该类患者临床妊娠率明显降低。过早黄素化也是DOR的表现。 4、鉴别异位妊娠:异位妊娠血P水平偏低,多数患者血P﹤47.7nmol/L (15ng/ml)。仅有1.5%的患者≥79.5nmol/L(25ng/ml)。正常宫内妊娠者的P90%﹥79.5nmol/L,10%﹤47.6nmol/L。血P水平在宫内与宫外孕的鉴别诊断中,可以作为参考依据。 (三)E2:基础值为25~45pg/ml正常月经周期中,卵泡早期E2约为183.5pmol/L(50pg/ml),排卵前达第一个高峰,可达917.5~1835pmol/L(250~500pg),排卵后迅速下降,黄体期形成第二个高峰,约458.8pmol/L(124.80pg),维持一段时间后,黄体萎缩时下降至早卵泡期水平,即来月经第3天应该为91.75~183.5pmol/ml(25~50pg/ml)。 1、基础E2>165.2~293.6pmol/L(45~80pg/ml),无论年龄与FSH如何,均提示生育力下降。 2、基础E2≥367pmol/L(100pg/ml)时,卵巢反应更差,即使FSH﹤15IU/L,也无妊娠可能。 3、监测卵泡成熟和卵巢过度刺激综合征(OHSS)的指标 ①促卵泡排出:促超排卵治疗时,当卵泡≥18mm,血E2达1100pmol/L (300pg/ml)时,停用HMG,当日或于末次注射HMG后24~36小时注射HCG10000IU。 ②E2﹤3670pmol/L(1000pg/ml),一般不会发生OHSS。 ③E2﹥9175pmol/L(2500pg/ml),为发生OHSS的高危因素,及时停用或减少HMG用量,并禁用HCG支持黄体功能,可避免或减少OHSS的发生。 ④E2﹥14800pmol/L(4000pg/ml)时,近100%发生OHSS,并可迅速发展为重度OHSS。 (四)PRL PRL由腺垂体嗜酸性的PRL细胞合成和分泌。PRL分泌不稳定,情绪、运动、性交、饥饿及进食均可影响其分泌状态,而且随月经周期有较小的波动,具有与睡眠有关的节律性;入睡后短期内PRL分泌增加,下午较上午升高。因此,根据这种节律分泌特点,应在上午9~10时空腹抽血。PRL显著升高者,一次检查即可确定;PRL轻度升高者,应进行第二次检查,不可轻易诊断高泌乳素血症(HPRL)而滥用溴隐亭治疗。 PRL≥25ng/ml或高于本单位检验正常值为HPRL。 PRL﹥50ng/ml,约20%有泌乳素瘤。 PRL﹥100ng/ml,约50%有泌乳素瘤,可选择性做垂体CT或磁共振。 PRL﹥200ng/ml,常存在微腺瘤,必须做垂体CT或磁共振。 PRL降低:席汉综合征、使用抗PRL药物如溴隐亭、左旋多巴、VitB6等。(五)睾酮COS患者T呈轻度到中度升高;卵巢或肾上腺有分泌雄激素的肿瘤及多毛症T升高。
第一节 历史 1677年,荷兰学者列文(Lesuwen Hock)在显微镜下首次观察到了人类精子。 1770年,在伦敦由约翰(John Hunter)为一个尿道下裂病人首次进行人工受精。 1924年,爱赛乐斯(Esels W.L)进行了27例卵巢子宫移植,4例临床妊娠,早期流产。 20世纪中期 开始探讨体外授精---胚胎移植。 1950年美籍华人张民觉和澳大利亚的奥斯汀(Austin)提出精子获能理论,即“奥斯汀.张定律” 1959年张民觉和奥斯汀成功地完成了兔子体外授精试验,胚胎移植获得成功。 20世纪70年代初,英国曾有人类体外授精成功,但移植后失败。1978年,英国诞生了世界上第一个试管婴儿路易斯.布朗。由世界试管婴儿之父、产科医生Steptoe,生物学家Edwards共同研究成功。20多年后,已有30多万个试管婴儿来到人间,仅美国1993年一年就进行了41209个周期,分娩了8741名婴儿。 1984年,Asch报告第一例配子输卵管内移植(GIFT)妊娠成功。 1989年,Devroey用合子输卵管移植(ZIFT)治疗67例不明原因不育与62例男性不育,其妊娠率达47.6%和42.2%。PC.Wong曾做胚胎输卵管移植(TET)50例因GIFT失败者,12例获足月婴儿。 1983年胚胎冻存(embryo cryopreservation)由Trouson报道获得成功。 1992年世界首例单精子卵母细胞浆内显微注射(ICSI)成功于比利时。着床前遗传诊断(PGD)技术是近年来才发展起来的,大约世界上有50多家可以进行。 我国60年代开始进行人工受精。80年代开始成立精子库。1988年春,我国大陆首例试管婴儿在北京医科大学诞生。相继湖南、广州、济南等地也有试管婴儿出生。1996年中山医科大学分娩我国首例卵母细胞浆内单精子显微注射的试管婴儿。2000年世界上第一例α-地中海贫血种植前基因诊断后试管婴儿也在我国中山医科大学获得成功。 第二节 辅助生育技术概念 一、辅助生育技术主要包括 (一)体外技术授精与胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET) 从人体取出配子使之在体外条件下授精后形成胚胎,然后移植所获胚胎至子宫腔让其植入从而建立妊娠的技术,又称试管婴儿。 (二)卵母细胞浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI) 卵母细胞浆内单精子注射是利用显微操作技术将单个精子直接注入卵母细胞浆内以建立妊娠的技术。 (三)人类胚胎种植前遗传学诊断 种植前遗传学诊断(preimplantation genetic diagnosis, PGD)以体外授精与胚胎移植技术为发展基础,结合显微操作技术、胚胎学、遗传学和分子生物学研究,特别是单细胞DNA分析技术的研究而发展的新技术。PGD通常是从体外受精后6-10细胞阶段的胚胎活检1~2个细胞进行DNA 分析,将诊断无遗传病的胚胎移植入子宫,从而防止遗传病患儿的妊娠。 二、辅助生育技术派生的助孕技术主要包括 (一)宫腔内人工授精(intrauterine insemination,IUI) IUI的精子必须经过处理,所谓优选精子,是指去掉精浆及前列腺素及细菌等,冷冻精子更可以去掉致病细菌,目前很多人主张用控制性超排卵结合IUI,可达到很高的妊娠率。宫腔内人工授精有AIH(artificial insemination husband), AID(artificial insemination donor). (二)配子输卵管内移植(Gamete intrafallopian tube transfer,GIFT) 采用GIFT助孕是将精子的浓度增加与卵子一起放入输卵管内企图模仿自然受精过程以达到提高妊娠率,自1984年Asch报告第一例GIFT妊娠成功,这成为继IVF-ET之后的大多数助孕技术中常用的技术,与IVF-ET作为变更使用的助孕技术。 (三)胚胎输卵管移植( tubal embryo transfer,TET) 男性因素不育进行GIFT治疗只有15%妊娠率,人们设想如将卵子在体外先受精成胚胎然后再放入输卵管内其成功率会增加。本方法放入胚胎越多,妊娠率越高。 (四)合子输卵管移植(zygote intrafallopian transfetr,ZIFT) 取卵子与受精步骤与IVF-ET相同,但于培养16~22小时达原核阶段则以腹腔镜技术将合子通过导管送入输卵管壶腹部,每侧送入2个。 (五)配子宫腔移植(gamete intrautenine transfer,GIUT) 经阴道B超或经腹腔镜取卵与经处理精子混合输入子宫腔内让其受精。 (六)经腹腔精子与卵子移植(peritoneal oocyte and sperm trasfer,POST) 早期POST是经腹途径,由于阴道取卵提供比腹部更方便途径,阴道探头能靠近卵巢,使声像清楚,操作上相对简单,本方法适应于非输卵管因素不明原因不育。但同样要经超排卵,阴道取卵过程,但强调避免过多出血,然后将4106/ml精子与4个卵子经穿剌针引导放入输卵管伞部与卵巢旁。 (七)直接经腹腔内人工授精(direct intraperitoneal insemination,DIPI) 用经洗精处理的精液0.5~1.0ml,用22cm19G长针经阴道穹窿注入子宫直肠窝内,本法操作不难,成功率通常较经超排卵治疗的IUI低,宜用于宫颈口狭窄IUI操作困难病者。 (八)赠卵子与赠胚胎(Oocyte and embry donation) 赠卵子和赠胚胎是应用体外授精与胚胎移植的方法以供赠的卵子形成胚胎或供赠的胚胎移植至受者母体的子宫中使缺乏产生卵子或胚胎能力的不育症患者建立妊娠的技术。 人类胚胎的辅助孵出(assisted hatching,AH),辅助孵出是以物理、化学等技术人工地帮助胚胎从透明带孵出的辅助生育技术。 辅助生育技术指涉及对人卵子进行操作的治疗不育症的一系列技术。典型的如体外受精与胚胎移植 (in vitro fertilization and embryo transfer, IVF-ET) 技术、单精子卵母细胞浆内显微注射(intracytoplasmic sperm injection, ICSI)技术等。广义的辅助生育技术尚包括如宫腔内人工受精、超排卵等一些较简单的不育治疗方法。体外受精技术诞生后近二十余年,辅助生育技术已获得广泛和深入的发展,成为不育症治疗最有效的手段。 第三节 诱发排卵和超排卵 诱发排卵(Induced Ovulation)指病人存在排卵障碍的情况下采用药物或手术(如多囊卵巢的楔形切除)的方法诱导排卵的发生,一般以诱发单卵泡或少数卵泡的发育为目的;超排卵(Superovulation)又称控制的卵巢刺激(Controlled Ovarian Stimulation)技术,指以药物的手段在可控制的范围内诱发多卵泡的发育和成熟,治疗的对象可能本身有正常的排卵功能。诱发排卵和超排卵是治疗不育症的重要手段,也是辅助生育技术的基础技术之一。 一、诱发排卵和超排卵常用的药物 (一)枸橼酸克罗米酚 枸橼酸克罗米酚(clomiphene citrate,CC)为最常用的促排卵药,化学结构与雌激素近似,兼有雌激素和抗雌激素的作用。可能是通过竞争性结合下丘脑细胞内的雌激素受体,影响下丘脑-垂体-卵巢轴的功能,间接促进卵巢内的卵泡生长、发育、成熟和排卵。其作用的发挥有赖于丘脑-垂体-卵巢轴正负反馈机制的完整性。可于月经的第3天至第5天开始给药,每天口服50~100毫克,连用5天。对常规5天给药反应欠佳者可适当增加用药的剂量,但应密切注意副反应的发生如血管舒缩性潮红、卵巢增大、腹部不适及少见的视物模糊、恶心、呕吐、头痛、疲乏等,停药后数天至数周可消失。使用克罗米酚也应注意卵巢过度刺激综合征发生的可能。有人认为过度增加剂量或延长使用时间将会降低子宫内膜对胚胎的接受性或增加自然流产率。 (二)卵泡刺激素 卵泡刺激素(follicle stimulating hormone,FSH)包括尿提取FSH(u-FSH)、尿提取高纯度FSH(u-FSH HP)、基因重组人FSH(r-h FSH)。重组FSH与生理FSH的作用相似,对卵泡的募集和生长有直接增强作用,现已常规应用于超排卵的各种方案中。 FSH的应用剂量及时间依据个体反应性和治疗方案的差异而不同。可于卵泡早期如月经第3天至第5天开始每天肌注75-150iu,至恰当的卵巢反应性的出现,再使用hCG诱发排卵。对反应不良者,可以加大使用剂量。使用过程中应通过超声显像和激素测定进行监护,以防止卵巢过度刺激综合征的发生。极少出现注射部位局部的反应、发热、关节痛等。 (三)人类绝经期促性腺激素 人类绝经期促性腺激素(human menopausal gonadotropin,HMG)是从绝经期妇女尿中提取的人体绝经期促性腺激素,含1:1的FSH和LH,尤适用于下丘脑、垂体性无排卵或低促性腺激素性腺功能低下闭经的治疗。因含有LH,不适用于基础LH水平升高的病人如多囊卵巢综合征患者。 (四)人绒毛膜促性腺激素 人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,hCG)的化学结构及生物学活性与LH类似,在体内第一半衰期为5~6小时,第二半衰期为23.9小时,故一次注射hCG10000IU可产生相当于自然周期排卵前LH峰值的20倍效能,且作用持久,可促发卵泡成熟及排卵,也用于支持黄体功能,于排卵后每2~3天一次应用小剂量hCG1000~2000IU。 (五)促性腺激素释放激素及其类似物 1.促性腺激素释放激素 促性腺激素释放激素(gonadotropin releasing hormone,GnRH)是天然十肽,从下丘脑以一系列小脉冲的形式每60-120分钟一次释放,进入垂体后与受体结合,导致LH和FSH释放,FSH刺激卵巢卵泡发育排卵,当下丘脑闭经时,可利用外源性的GnRH脉冲泵给药,达到排卵目的。 2.促性腺激素释放激素激动剂 促性腺激素释放激素激动剂(gonadotropin releasing hormone agonist)是体外受精与胚胎移植的控制性超排卵中常用药物,有多种制剂,如zoladex(诺雷德)、decapeptyl(达必佳)、diphereline(达菲林)和enantone(抑那通)、buserelin(suprecur)等。这些制剂在天然GnRH十肽基础上的第6、10位以不同的氨基酸、酰胺取代原来氨基酸的结构。这种改变可使其对GnRH受体有更高的亲合力,效能较天然的增加上百倍,且更为持久。用药初期因其激动作用有一个短促的血浆促性腺激素高峰,持续应用使垂体的受体明显地丢失并得不到补充,因而垂体不能对内源性或外源性的促性腺激素释放激素进一步发生反应;持续而非脉冲式兴奋垂体可能增加它的无反应性,导致垂体的LH和FSH分泌显著减少,呈药物去垂体状态,这称垂体降调节,但可随停药而恢复。 3.促性腺激素释放激素拮抗剂 促性腺激素释放激素拮抗剂(gonadotropin releasing hormone antagonist)是对GnRH的第1、2、3、6、10位氨基酸的修饰形成的拮抗物,与GnRH受体结合后却不产生信号的转导,从而阻断GnRH对垂体的作用,同样达到垂体降调节的目的。 在促超排卵中使用GnRH-a基本有如下目的:⑴利用垂体的降调节,减少早发LH峰(Premature LH Surge)的发生;⑵利用垂体的降调节,减少内源性的LH分泌,降低血浆内的LH水平;⑶在卵泡的募集阶段使用激动剂,利用用药初期的血浆促性腺素高峰,从而增加卵泡募集的数量;⑷改善卵泡发育的同步化,争取在同一时点有更多的卵泡成熟;⑸可以更主动地决定hCG的使用时间,有利于工作的安排。 (六)溴隐亭 溴隐亭(bromocriptin)能抑制垂体分泌催乳激素,适用于无排卵伴有高催乳激素血症者;剂量2.5mg开始,若无反应,可逐步增加剂量;一般连续用药3~4周时垂体催乳素降至正常,月经恢复并维持适当剂量溴隐亭,催乳素正常者多可排卵。若无排卵可加用克罗米芬。 新型的溴隐亭长效注射剂( Parlodel LAR)可克服口服造成的胃肠道不良反应。注射第一天即可使血PRL迅速下降,并可使PRL的水平低于治疗前达28天,达到迅速及长时间抑制PRL水平。Parlodel LAR适用于有明显胃肠道反应的患者及较大腺瘤的患者。 诺果宁(Norprolac) 诺果宁(Norprolac)是一种新型的消旋非麦角类长效多巴胺激动剂,对于大腺瘤、对溴隐亭耐药或不能耐受的高泌乳素血症治疗更有效。 二、超排卵治疗 (一)适应症 1. 下丘脑-垂体功能衰竭时的替代性治疗或下丘脑-垂体功能不全时的刺激性治疗; 2. 其它无排卵性不育症经简单的诱发排卵失败的患者; 3. 作为其它辅助生育技术的一部分如IVF-ET的超排卵。 (二)禁忌症 激素依赖性肿瘤患者、激素依赖性恶性肿瘤及其治愈后、不明原因的卵巢增大或卵巢赘生物、盆腔急性炎症等。 (三)技术过程注意事项 1.防范严重并发症的发生,应根据患者的具体情况包括年龄、内分泌状态、原来存在的病理生理情况、过去对超排卵的反应性等因素全面评估后制订超排卵方案; 2.首次超排卵治疗推荐使用FSH的启动剂量为每天150iu以下,有指征的可使用225iu,须有特别强烈指征者才可使用300iu以上剂量; 3.超排卵过程一定要配合以适当的监护措施,最少应得到B超的监护,强烈推荐结合激素测定的监测方法;监测的过程要注意了解患者的卵巢对外源性促性腺激素的反应性、卵泡的生长发育情况,观察排卵、黄体功能,发现早期妊娠,及早发现并发症的发生,从而指导药物的选择、药物剂量的调整、选择正确的hCG使用的时间乃至并发症的预防和处理。 (四)超排卵方案 典型的超排卵方案通常包括垂体降调节、诱发多卵泡发育和成熟、刺激排卵以及黄体功能的支持等内容。在常规方案中,降调节多始于黄体中期,直至下一周期注射hCG时停药;促性腺激素常于月经的第3~5天开始,直至卵泡达到成熟的标准(主导卵泡平均直径1个大于18mm或2个大于17mm或3个大于16mm、或根据血雌激素水平决定)。刺激排卵是使用hCG模拟排卵前的LH峰诱发卵泡的最后成熟并激发排卵机制。hCG的使用多在最后一次使用FSH或HMG后的36小时,然后在hCG使用后的36小时回收卵子,在以后的黄体期,使用hCG或黄体酮进行黄体功能的支持。 促超排卵方案的各个环节可依据不同的情况可以进行适当或必要的调整,方案的选择或用药或剂量的调整,应综合考虑以下问题:各种药物作用的差异、治疗的目的、患者对促超排卵的反应性、患者的卵泡发育模式、患者的年龄、患者是否存在其它病理情况等各种因素,以实现治疗方案的个体化(表 34-1)。 第四节 辅助生育技术 一、体外受精与胚胎移植 从人体取出配子使之在体外条件下受精后形成胚胎,然后移植所获胚胎至子宫腔让其植入从而建立妊娠的技术,又称试管婴儿。 (一)适应症 1.碘油造影、腹腔镜术或手术证实输卵管性不育:如严重盆腔粘连、双侧输卵管梗阻、双输卵管切除术后、双输卵管结扎术后(必须符合计划生育政策)等; 2.盆腔子宫内膜异位症,反复其它治疗未能妊娠; 3.顽固性PCOS经反复治疗失败; 4.不明原因不孕,反复的一般治疗(包括多次超排卵)失败; 5.男性因素的不育症:如少、弱精经一般的治疗(包括宫腔内人工受精或结合使用促超排卵技术)后仍未能获得妊娠的病人。 (二)治疗前检查 女方:进入IVF前的患者需做下列检查: 一般的体格检查、血液常规、血型、尿常规、肝功能、肾功能、胸部X光检查、卵泡早期血清激素水平(LH、FSH、PRL、T、E2)、常规妇科检查、宫颈分泌物的支原体、衣原体检查; 男方:精液常规>(2次); 在确认患者没有不能耐受促超排卵及妊娠的内、外科疾病,肿瘤等,确认病人具备恰当的适应证和没有禁忌症后,进入治疗程序。 (三)技术步骤或注意事项 1. 技术要求包括熟练的超排卵及其监测、取卵、体外受精、胚胎培养、胚胎移植技术; 2. 治疗开始之前应向夫妇双方详细解释治疗的全过程、可能发生的并发症及其治疗方法,包括可能出现的女方对促超排卵无反应、取卵失败及不受精等导致的治疗失败。 3. 常规方案为月经周期的黄体中、晚期使用GnRH-a(短效),并于下月经周期第3~5天用FSH启动,常规启动的剂量为150~225iu;应根据患者的具体情况对超排卵方案包括使用药物的类型、剂量、使时间等作具体的调整; 4. 出常规方案的促性腺激素剂量的促排卵方案只能在以下病人使用:以前的治疗显示病人对超排卵治疗反应不良、重复三次卵泡早期的血FSH水平>15iu/mL或高于正常参考值+2个标准差、年龄大于40岁; 5. 各种方案的超排过程中,若注射Gn>7天,双卵巢无合适卵泡发育进行增加剂量后7天卵泡数仍<3个,血清E2值水平仍<1835pmol/L(500pg/ml)为反应不良,建议取消本次IVF-ET治疗周期; 6. 根据使用的治疗方案制定最少包括超声显像和血激素水平测定等措施的监测方案并认真执行; 7. 以黄体期使用促性腺激素释放激类似物的长方案为例,当使用GnRH-a一周后至月经来潮之前,若阴道B超下发生单/双卵巢出现有单纯性囊肿直径>1cm且<4cm 时,需要在严格消毒下行阴道穿剌抽出囊肿液送病理科检查,若无异常,方可继续方案; 8. 当使用FSH,B超监测双卵巢有卵泡直径>14mm时需每天监测尿的LH峰; 9. 当有>3个卵泡的平均直径达到16mm以上或2个大于17mm或1个大于18mm时,可考虑主导卵泡已达成熟阶段并使用hCG; 10. 以下情况应停用hCG,取消本周期:当双卵巢明显增大、卵泡数>20个时,必须检查血E2水平,如 E2水平>11000pmol/L(3000pg/ml)时,或当双卵巢明显增大>10cm,或当卵泡数>30个时,伴随有或没有腹水的出现,估计发生OHSS可能性大时; 11. hCG使用剂量常规为10000iu,注射后36~38小时取卵; 12. 取卵手术以经阴道超声显像引导下的卵泡穿刺引流术最为常用;手术过程既要注意无菌,也要注意无毒,以避免培养系统的影响;以无菌生理盐水清洗外阴及阴道,注意用力过度可能诱发卵泡破裂;可采用静脉麻醉或术前30分钟采用镇痛或镇静剂如肌注杜冷丁等,术前排空膀胱,取截石位,无菌生理盐水反复冲洗外阴和阴道。手术时尽量减少穿刺次数,避免损伤肠管、血管、输尿管、膀胱等,必要时可应用抗生素预防感染; 13. 术后可给予黄体酮或hCG进行黄体支持,注意如出血、感染、创伤等穿刺取卵术并发症的发生; 14. 当取卵>20个时,不能使用hCG进行黄体支持,并严密监测患者情况,注意OHSS的发生,并向患者交待注意事项。在胚胎移植当日,患者若出现OHSS的症状且中量以上腹水,双卵巢明显增大,雌激素水平较取卵前明显升高,取消本周期的宫腔胚胎植入,以后放置冷冻胚胎; 15. 所获卵子培养4~6小时后,向每个卵加入1×105条经洗涤的活动精子进行体外受精后继续培养; 16. 受精后16~20小时,除去卵母细胞周围的颗粒细胞,观察并确认受精情况;于倒置显微镜下,这时可以看到卵细胞内出现两个圆形结构,约1.5~2.0um,较致密光洁,这就是雌雄圆核,标志着正常受精的成功,卵细胞已成为受精卵又称合子。而无原核或出现单个的或三个以上的原核均提示异常受精; 17. 依据所采用的培养系统的差异,可于取卵后的2至5天进行胚胎移植,胚胎将处于多卵裂球至囊胚阶段。移植胚胎的数目应限制在3个以下,囊胚移植可仅移植1个或2个胚胎,对于40岁以上或反复治疗失败的患者可以考虑移植4个胚胎。将胚胎以专用的移植导管通过宫颈移植入宫腔,术后患者卧床休息1~6小时; 18. 随诊:于IVF-ET术后两周后若月经未来潮,晨尿查hCG或测定血清-hCG水平以判断妊娠,如阳性后于二至三周后超声检查有孕囊及胚芽与心血管搏动可以确定临床妊娠,孕产期应加强检查,及时作出相应处理,要注意宫外孕发生的可能; 19. 当患者有三次常规IVF-ET失败病史时,在申请第四次行IVF-ET治疗时,治疗方案必须在包括临床医生、实验室工作人员、护理人员的讨论会议上制订; 20. 二次IVF超排周期之间的间隔要大于3个月; 21. 前次常规IVF受精率<30%或完全不受精时,再次IVF治疗时,应先调查可能的不受精原因,并须考虑是否行ICSI和做进行ICSI的准备; 22. 对重复治疗的病例,接诊医师必须详细重温原病历,进行必要的检查以指导确定新的治疗方案,若发现问题及时向上级医师提出并详细记录; 23. 每周期在胚胎移植后给hCG行黄体支持(OHSS患者除外)。 (四)IVF-ET结局 近年,IVF-ET妊娠率逐渐提高,其临床妊娠率达到30%~60%,其中有10%~20%流产,2.4~9.6%异位妊娠,多胎妊娠率达20%~40%。 二、配子/合子/胚胎输卵管内移植输卵管移植 配子输卵管移植是从人体取出两性配子经处理、混合后将配子输送至正常的输卵管中令其在体内的环境下受精和发育,从而达到妊娠的目的的技术。 (一)适应症 同体外受精与胚胎移植,但必须通过造影或腹腔镜证实最少有一侧正常的输卵管; (二)治疗前检查 同体外受精与胚胎移植。 (三)技术过程或注意事项 同体外受精与胚胎移植并要求有熟练的腹腔镜技术;对于配子输卵管内移植,可于取卵后,将选定的成熟卵子混于已准备好的精子悬液中备用。选用专为经腹腔镜下的配子输卵管移植的导管,经腹腔镜插管后通过内芯注入含精卵混合物于正常的输卵管壶腹部。也可在合子或早期胚胎阶段进行输卵管内移植。术后处理同体外受精与胚胎移植并密切注意腹腔镜并发症的发生。 三、赠卵子与赠胚胎 赠卵子和赠胚胎是应用体外受精与胚胎移植的方法以供赠的卵子形成胚胎或供赠的胚胎移植至受者母体的子宫中以在缺乏产生卵子或胚胎能力的不育症患者建立妊娠的技术。 (一)供方基本条件 1.非商业行为,全身体格检查正常; 2.本人和家族无遗传病史,遗传学检查正常; 3.无精神疾病无传染病,非各种病毒性肝炎、淋球菌、支原体、衣原体、HIV等传染性疾病的携带者; 4. 于35岁的生育年龄妇女,已生育健康的子女; 5. 前各项检查(同体外受精与胚胎移植)正常; (二)接受方指征 1.卵巢功能丧失:卵巢早衰、手术、化疗、放疗所致卵巢功能衰竭、染色体异常导致性腺发育不全、半乳糖血症,严重感染和自身免疫性疾病导致的卵巢功能衰竭 2.卵巢虽有功能但存在以下情况:卵子质量极差、促排卵治疗无效或反映不良或取卵非常困难无法满足对卵子数目的基本要求、严重的遗传性疾病等; (三)技术步骤或注意事项 1.同体外受精与胚胎移植; 2.对无卵巢功能的患者,应熟悉和掌握模仿正常月经周期、建立适合妊娠的子宫内膜的激素替代疗法。HRT方案包括两种①逐渐增量方案②恒定剂量方案。于月经的第5天开始给雌激素,子宫内膜的厚度>8mm,开始注射黄体酮后第3天移植胚胎; 3. 悉和掌握对无卵巢功能患者妊娠后使用激素维持妊娠的技术; 4. 注意进行排卵监测以准确决定排卵时间和胚胎移植时间,将胚胎移植入受者的子宫内; 5. 卵者应对医疗全过程及其并发症充分知情并签署同意书; 6. 者应对所承担的涉及赠与者的责任充分知情并签署同意书。 四、卵母细胞浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection) 卵母细胞浆内单精子注射是利用显微操作技术将单个精子直接注入卵母细胞浆内以建立妊娠的技术。 (一)适应症 1.严重男性因素不育(必须以三次以上的检查确认):包括少精症、弱精、畸型精症、部分无精症; 2. 往治疗中受精失败或受精率极低; 3. 子冷冻保存后,或不成熟卵子经体外培养成熟后,需要采用ICSI辅助受精; 4. 性连锁性疾病、染色体平衡移位、地中海贫血的患者等进行种植前诊断技术上要求ICSI者; 5. 反复IVF失败。 (二)治疗前检查 1.同体外受精与胚胎移植; 2.男方检查:内分泌检查FSH、LH、T, 染色体核型检查,无精症者行睾丸或附睾穿剌抽吸检查; 3. 疑由有遗传性因素引起的男性不育,应进行有关遗传检查。 (三)技术过程或注意事项 1.同体外受精与胚胎移植; 2.必要时行副睾、睾丸穿刺取精技术(应有泌尿外科医生的参与); 3.需要熟练的辅助生育显微操作技术:按要求准备后精子和去除颗粒细胞的卵子,在显微镜下先将视野调至含有精子的液面的边缘,选择一条活动的形态正常的精子,将注射针稍稍调高,垂直放于活动精子尾部的中点,慢慢下压,随即将注射针快速拉过精子尾部,精子被制动。被子制动的精子先尾后头吸入注射针内,然后将显微注射针转至有卵子的液滴。用显微固定针固定卵子,将显微注射针与卵子均调节至最清晰状态,注射针位于卵子的正中部位,卵子的极体部位于11~12点位置或6~7点位置。将精子推至注射针尖端处,注射针于3点位置垂直穿过透明带及卵子胞浆膜进入胞浆内,因吸部分胞浆至胞浆膜破裂,然后将回吸的胞浆同精子及尽量少的PVP一起小心注入胞浆,最后撤出注射针,精子留在胞浆内。受精后16~19小时观察原核并更换培养液; 4. 述情况不宜进行ICSI:严重的染色体异常、严重先天畸形、严重的遗传性疾病等; 5. 再进行睾丸或附睾取精进行ICSI应在首次睾丸或附睾活检术后4~6个月; (四)ICSI治疗的安全性与存在问题 用正常精液进行IVF与ICSI的妊娠率无显著差异,但ICSI是侵入性治疗,所以仅限于有必要者。 ICSI帮助了少、弱、畸精子的受精。但是,已经证实一些遗传性的基因缺陷可导致少、弱精,本来在自然受精过程中被淘汰的遗传缺陷通过ICSI传递到下一代。此外,注射操作也可能致卵母细胞未知的损伤。因此,对ICSI治疗后的妊娠,应加强妊娠和产后的随诊。 五、人类胚胎的辅助孵出 辅助孵出是以物理、化学或生化技术人工地帮助胚胎从透明带孵出的辅助生育技术。 (一)适应症 1.透明带过厚(大于14um); 2.暨往治疗中提示存在胚胎的孵出困难; 3.反复的怀疑与种植困难有关的IVF或ICSI失败; 4.年龄较大(如大于40岁)可能存在孵出或种植困难的患者; (二)技术过程或注意事项 1.同体外受精与胚胎移植; 2.成熟、稳定的IVF-ET技术; 3.熟练的辅助生育显微操作技术; 4.成熟、稳定的囊胚培养技术; 六、遗传缺陷的胚胎植入前诊断 PGD是指运用分子生物学的方法在胚胎植入前的阶段进行遗传学诊断,选择不带有所检测的目标致病基因的胚胎进行移植以建立正常妊娠的技术。通常是从体外受精后6~10细胞阶段的胚胎活检1~2个细胞进行遗传学分析,从而防止遗传病患儿的妊娠。 (一)适应症 1.单基因遗传病: 常染色体隐性遗传病:如β-地中海贫血、纤维囊性变 常染色体显性遗传病:如α-地中海贫血 X-染色体伴性遗传病:如血友病 2. 联体重复序列异常如:如脆性X染色体综合症; 3. 色体数目和结构异常:非整倍体、平衡易位、罗伯逊易位; (二)PGD技术过程或注意事项 1.同体外受精与胚胎移植; 2.种植前人类胚胎活检 (1)胚胎活检时机:卵裂期胚胎活检是目前较为切实可行的方法。本中心选择授精后64h进行活检,此时大多数胚胎已发育到6~8细胞期,12小时后待PGD获得结果,再选择胚胎进行移植治疗。 (2)胚胎活检方法:用Hepes缓冲液(以下简称 Hepes)25ul在Falcon 1006皿上作液滴数个,再将Tyrode’s酸液(pH2.4)10 ul放在Hepes液滴旁,上盖矿物油。进行卵裂期胎活检时,将受精后48~72小时的胚胎加入Hepes液滴中,用固定针通过负压将胚胎固定,用吸有Tyrode’s液的喷酸针靠近透明带将其烧灼形成一大小为30~50um的孔,然后再换用吸样本针伸入透明带缺口,吸出一个或多个卵裂球。完成活检后,即将胚胎从固定针上放开,立即将胚胎从Hepes液中捡出,冲洗后放入培养液中继续培养。吸出的卵裂球则放入Eppendorf管中或移在载玻片上,依次逐个完成各个胚胎的活检。 (3)胚胎活检注意事项:人胚体外生长需要稳定的培养环境。任何加于胚胎的操作必然引起其所处的环境波动,而且活检更是一种创伤性操作,包括溶解透明带时喷出的Tyrode’s液所产生的不良影响。人胚发育阻滞易发生于8细胞期,而活检正在这时或稍前进行,此时的胚胎对显微操作的创伤更为敏感,所以活检可以影响胚胎的发育和种植,表现在发育停止,即使生存,其发育也可能延迟或不良,移植后则易错过内膜的种植窗,而且细胞团的细胞数也有所减少,胚胎质量下降,不易种植。为尽量减少甚至避免活检造成的不良影响,应注意:①将需活检操作的胚胎置Hepes缓冲培养液中,它在无需CO2平衡条件下,能保持稳定的PH值与渗透压。②喷酸针内径应在10um左右为宜,太大喷出Tyrode酸量大,烧去透明带太迅猛,以致无法控制殃及卵裂球,甚至改变胚胎所处环境的PH值。太细,喷出的酸量太少不足以溶解透明带。③溶解透明带形成的孔大小约为所吸卵裂球的2/3,太小,不易将卵裂球吸出,或卵裂球局部受力易于破裂,太大,可能吸上两个卵裂球,甚至由于卵裂球间细胞连接的形成而将全部卵裂球吸出,且喷出过多的酸影响卵裂球的发育或透明带缺口太大,失去其保护作用。④当透明带溶解达所需的深度及径线后,立即停止喷酸,同时将胚胎移动离开喷酸区域,不须再将Tyrode酸回吸进去,因此一根喷酸针可用于一批胚胎的活检,不需反复更换,则节省了整个操作时间。⑤每一胚胎在培养箱外的时间应该尽量缩短,所以活检后立即放回然后再取出第二个进行活检。⑥活检的培养液应不含Ca2+,Mg,以减少卵裂球间之细胞连接的形成,有利于活检的顺利完成。若培养液含有Ca++,Mg++,常遇到卵裂球间细胞连接紧密,拉拉扯扯多次才能将一个卵裂球吸出,因而需有耐心。 3.种植前单细胞诊断技术:诊断的技术主要包括PCR和荧光原位杂交(fluorescent in situ hybridization,FISH)及其由PCR和荧光原位杂交衍生的一系列技术。PCR技术主要用于单基因疾病的诊断,而荧光原位杂交技术主要用于染色体疾病的诊断。PCR和荧光原位杂交均可用于性连锁疾病的性别鉴定。单细胞PCR的主要问题在于单个拷贝的扩增可能导致扩增失败以及PCR的高度敏感致污染的可能,而荧光原位杂交能进行特异染色体的检测,实验整个过程可从形态上观察,在进行性别鉴定时有其优势,但也容易受杂交失败或信号过弱的影响。对于染色体核型为45XO的胚胎细胞来说,无论是PCR还是荧光原位杂交都无法做出诊断。因此,在进行临床PGD时分别地分离两个细胞进行诊断较分离一个细胞为好。 第五节 辅助生殖技术的并发症 随着辅助生育技术的普遍开展,接受该技术的患者数量的增多,使这些技术在对母亲和下一代的影响等方面的不足和瑕疵逐渐显示出来。尽管其原因是复杂的,但应该引起我们足够的重视。与自然生育过程相比较,不同的辅助生育技术在许多方面可以有所区别,如涉及超排卵、卵子或精子的操作、体外受精、胚胎的体外培养、胚胎的操作、胚胎移植、胚胎的数目等等。 一、卵巢过度刺激综合征 卵巢过度刺激综合征(Ovarian Hyperstimulate Syndeome, OHSS)是应用诱发排卵或超排卵药物后所引起的一种严重并发症。临床上表现为恶心、呕吐、腹部不适、胸、腹水、体重增加、卵巢增大、少尿、水电失衡、肾衰、血栓形成等,严重的可危及生命。 卵巢过度刺激综合征的发生与病人所用促超排卵药物的种类、剂量、治疗方案、病人的内分泌状况及妊娠有关,病人体质也是因素之一。OHSS的致病因素可能通过激活了肾素-血管紧张素-醛固酮系统、某些炎症性介质如组织胺、五羟色胺的增加、血管通透因子mRNA的表达增加、高水平的E2等机理导致了OHSS病人最大的病理生理特征即毛细血管的通透性的增加,体液大量外渗并继发一系列的改变,从而导致腹水、胸水甚至弥漫性水肿;大量的体液外渗导致血液浓缩、有效血容量降低;前者进一步加重血液的高凝状态,影响微循环的灌流,血粘稠度增加,凝血功能障碍甚至血栓形成,后者继发肾灌流量减少、肾近曲小管对盐和水分重吸收增加,导致尿量减少,甚至无尿,同时伴水电解质紊乱、氮质血症;临床表现为胃肠道不适,腹水、胸水、少尿、卵巢增大等,形成复杂的综合征。 OHSS的临床表现及其分度:根据临床与实验室的表现,OHSS可分为轻、中和重度。①轻度:症状和体征通常于排卵后3~6日或注射hCG后的5~8日开始出现,有下腹不适、沉重感或轻微的下腹痛,伴胃纳差,略有疲乏。E2水平5500pmol/L(1500pg/ml),黄体早期孕酮值96nmol/L,B超检查卵泡不少于10个,卵巢增大直径可达5cm,有或无卵泡囊肿/黄体囊肿;②中度:有明显下腹胀痛,可有恶心、呕吐、口渴,偶伴腹泻;体重增加3kg,腹围增大;E2水平11000pmol/L(3000pg/ml),卵巢增大明显,卵巢直径在5~10 cm 之间,腹水1.5升;③重度:腹水明显增加,腹胀痛加剧,病人口渴而多饮但尿少,恶心、呕吐、腹胀满甚至无法进食、疲乏、虚弱、冷汗甚至虚脱;因大量腹水而使膈肌升高或胸水致呼吸困难,不能平卧;卵巢直径10 cm;体重增加4.5kg。由于胸水和大量的腹水可导致心肺功能障碍,可有血液浓缩、高凝状态、电解质失衡、肝肾功能受损等。一般在接受促超排卵的病人中,OHSS的总体发生率为23.3%,其中轻度为8%~23%,中度为1%~10%,重度为0.5%~2%。在受孕周期中,OHSS发生率大约4倍于非孕周期;OHSS病人中妊娠率也显著增高,较非OHSS病人大约增高2~3倍。 如未妊娠,月经来潮前临床表现可停止发展或减轻,月经来潮后上述表现迅速缓解并逐渐消失,如病人在月经来潮时间前一周内出现上述症状并呈逐渐发展的趋势,提示可能有OHSS发生。一旦妊娠,OHSS将趋于加重,病程延长,甚至可达整个早期妊娠阶段。 严重的OHSS还可以引起以下相关的并发症:张力性腹水、卵巢或附件的扭转、肝功能障碍、肾功能障碍、成人呼吸窘迫综合症、血栓形成(如颈内静脉栓塞、脑梗塞、双上下肢栓塞、肝静脉和其他血管栓塞导致多器官功能障碍)、心肌梗塞等。 所有的OHSS病人应处于恰当的监护下。应常规每天记录液体的出入量和腹围;注意心肺功能、水与电解质的平衡和血凝状态等情况。过多地输注晶体液有可能增加液体向腹腔和胸腔的移动量从而加速病情的发展。其它措施包括①应注意休息和少量多次进食。重度患者应停止使用任何促性腺激素药物包括hCG。②在各器官功能状态及水与电解质、酸碱平衡等各项指标正常的情况下尽量密切观察,少作干预;③使用人体白蛋白;④腹腔或胸腔穿刺引流腹水或胸水,以减轻症状。较重的病人可同时引流卵巢内的黄素囊内液以减少进入血循环的E2量;⑤必要时可使用低分子右旋糖酐静脉滴注(扩充血容量、疏通微循环)甚至抗凝治疗(预防血栓形成);⑥改善毛细血管通透性;⑦注意卵巢囊肿破裂、出血或扭转的发生,必要时手术治疗,但应尽量保留卵巢;避免作不必要的妇科检查,以免诱发卵巢破裂;⑧应注意预防感染;⑨严重的患者应果断采取治疗性人工流产,中断妊娠。 OHSS预防措施:由于治疗基本上是对证的,所以预防远较治疗有效。以下的措施可供参考。①小心选择超排卵的对象;②对有OHSS倾向的病人应采用低剂量的超排卵方案; ③使用高纯度的FSH产品; ④有严重OHSS发生的可能,应停用Gn,而继续使用GnRH-a,以降低体内的Gn水平,加速卵泡萎缩;⑤加强超排卵过程的E2水平与B超监测,及时调整Gn用量;⑥Gn中断疗法:对有可能发生严重OHSS者,当血清E2水平>高于10000pmol/L时,停止使用外源性Gn 1~5天,至E2水平<10000pmol/L再注射hCG,文献报道有减少严重OHSS发生的作用;⑦不使用hCG作黄体支持;⑧将胚胎冷冻保存不进行移植,留待以后在非超排卵周期再移植;⑨使用白蛋白。 二、超排卵治疗与肿瘤 促排卵药物一方面因促性腺激素促进卵巢上皮组织的增殖分化,从而增加恶变的危险性;另一方面排卵数目及次数的增加,其所伴随的卵巢上皮细胞反复的损伤和修复可能增加肿瘤发生的危险性;此外,在诱发排卵的过程中,多卵泡的发育和排卵产生高水平的雌激素,可能使妇女面临乳腺癌潜在生长的环境。虽然现有的资料还不能明确促排卵药物与肿瘤之间的关系,也没有必要改变促超排卵药物在临床的应用,但应加强监测,以便及时发现肿瘤并进行治疗。对卵巢交界性或恶性肿瘤或其他性激素依赖性肿瘤的不孕患者,治疗后不宜再接受促超排治疗,以防增加肿瘤复发的危险性。 三、取卵穿刺的损伤与出血 阴道B型超声扫描引导下取卵一般是安全的,但可能损伤邻近肠管、输尿管、膀胱甚至血管,进而引起继发的问题如盆腔内出血。操作者必须注意穿刺针的整个行程,应特别注意避开管道样结构。其临床表现包括疼痛、血尿、腹膜刺激症状、甚至休克等。腹部超声检查可协助诊断。 因此,手术者应熟练掌握B超扫描盆腔器官的影像学,熟练掌握取卵穿刺技术,正确操作;取卵过程应向病人解释清楚,消除病人恐惧心理,取得病人合作,并给病人一定剂量的镇静、镇痛剂;进针全程必须注意避开有关器官和结构,注意吸出的内容物可能与穿刺目标不相符合,如大量的尿液、气体等;可疑有盆腔粘连时更应注意。 四、感染 在大多数IVF患者中,器质性因素是不育的原因,经阴道操作使他们重复感染的危险升高。有盆腔脓肿或卵巢脓肿形成的文献报道。术前注意外阴、阴道、宫颈的清洁和冲冼,手术时尽量减少穿刺次数,避免损伤肠管,必要时应用抗生素预防感染。 五、腹腔镜术中的并发症 包括麻醉并发症和腹腔镜术中并发症 六、妊娠并发症 (一)自然流产 用克罗米芬枸椽酸治疗的患者自然流产率和染色体畸变率均不高,但仅用HMG或IVF总体方案治疗的流产率为25%左右,其原因是:不育症患者普遍年龄偏高与染色体畸变患病率增高相关,具有较高的多胎妊娠率伴随流产率增高。 (二)异位妊娠 在IVF-ET过程中,异位妊娠发生率为2.1%~9.4%,比自然妊娠明显增高,体外受精与胚胎移植术后异位妊娠的发生可能与胚胎移植时移植管放入宫腔的深度、移植管内的液体量、移植时注入的速度、植入胚胎数目多少、移植后患者的体位、胚胎在宫腔内游走、胚胎与子宫内膜发育的同步性、子宫输卵管患病率较高有关。在辅助生殖中也发现某些罕见的异位妊娠部位,如宫颈妊娠发生率为IVF-ET妊娠的0.1%。 (三)先天性畸形 有学者报道IVF-ET胎儿的畸形发生率为2.25%左右。有文献报道,IVF后的男性新生儿其尿道下裂发生的危险性有5倍的升高。 (四)多胎妊娠 多胎妊娠目前在IVF-ET中可达到50%,已成为IVF-ET过程中高度重视的问题。多胎妊娠尤其是3胎以上者,低体重儿、产科并发症如早产、产后出血、妊高征、胎膜早破等发病率增加,多胎妊娠随胎儿数目增加而妊娠期缩短,严重影响母儿围生期的预后。 为了尽可能减少IVF-ET的多胎妊娠的发生,应严格控制移植的胚胎数目,剩余胚胎则冻存。对于超过两胎以上妊娠者,应用选择性减胎术,这样可延长孕周,减少早产,同时减少多胎妊娠的并发症。选择性胚胎减灭术主要以超声显像引导下进行,包括经腹部和经引导两中途径。经腹部途径是在实时超声显像的引导下经腹壁进针穿过腹壁各层和子宫壁进入所减灭的胎囊,继而刺入胎心搏动区,最好能回抽到胎儿血液后注射15%氯化钾溶液0.6~1.2ml致胎心搏动停止。经腹途径的缺点是腹肌张力大,针尖活动方向不容易掌握,不易将药物准确注入胎儿心脏,操作较费时,而且因此常在较大妊周进行导致待吸收的胎儿物质较多,可能影响母体的凝血功能等。经阴道途径是在经阴道实时超声显像的引导下经阴道壁进针,经子宫壁进入胎囊,剌入胎心脏搏动区,通过高付压的抽吸与反复剌杀的机械破坏作用令心跳停止并抽空羊水,此方法可于7~8妊周进行,操作准确性高,分娩时几乎所有胎儿物质吸收完毕很少能见痕迹。 对IVF-ET妊娠的孕产妇应加强和重视围产期保健,及时防治产科并发症,以得到良好的产科结局。 (五)辅助生殖妊娠过程和分娩 辅助生殖妊娠产妇一般年龄较大,多胎妊娠发生率较高,与自然妊娠相比,其并发症可能较高,尤其是多胎妊娠明显,但年轻患者经辅助生殖获得单胎妊娠似乎与并发症发生率升高无关联。除非事先存在危险因素。当然,由于多胎妊娠发生率较高、年龄较大和较多的功能紊乱,其剖腹产率可能高于正常人群。 七、污染和交叉感染 人类IVF采用的培养介质或其它操作过程使用的液体或培养液含不同的成分包括蛋白质。蛋白来源通常为母亲血清、人血清白蛋白、牛血清白蛋白。即使加热灭活和过滤,培养介质也有受到污染的危险。操作过程也可能造成污染。在辅助生殖全过程中,必须建立严格的操作规程以降低因培养介质而感染的危险和并发症。新一代免除使用血清的培养液有助于防止该类污染的发生。操作不当可造成胚胎、母体以及实验实和临床工作人员间的交叉感染,这些感染可包括各种类型的肝炎或人类免疫缺陷性病毒(HIV)等。 目前,辅助生殖技术已被公认为是解决众多不育症的一个有潜力的方法。然而应该牢记,生殖治疗与广泛的并发症相关,它可能威胁患者生命。因此,应详细分析不育的病因,严格控制好指征。辅助生育技术可给那些在其他方面是健康的“患者”带来永久性的损害,甚至付出生命的代价